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(1)His 標簽蛋白純化填料
His標簽通常為構建蛋白時,在蛋白N或者C端添加的6個組氨酸標簽。蛋白表達出來之后,就會帶有6個組氨酸頭或者尾巴 , 此類蛋白通常使用金屬鰲合親和填料進行純化。利用過渡金屬離子與組氨酸標簽的相互作用,從而將蛋白純化出來。此類填料純化帶標簽的蛋白和包涵體蛋白
非常簡單方便。
根據配基鰲合金屬離子不同 ,可分為 Ni、Co、Cu、Zn 等幾種親和填料 。舉例 ,Ni 親和填料主要有 Ni IDA Welchrom 6B、Ni IDA Welchrom 6FF、Ni NTA Welchrom 6B、Ni NTA Welchrom 6FF、Ni NTA Welchrom 6B、Ni Cel Welchrom 6B、Ni Cel Welchrom 6FF、Ni Welchrom HP 等幾種填料。Ni IDA Welchrom 6B、Ni IDA Welchrom 6FF 配基為亞氨基二乙酸 ,是一種非常悠久的 Ni親和填料,由于 Ni 離子與配基鰲合鍵較少,容易受到小分子的攻擊而使 Ni 容易脫落。但其載量也相對較高。Ni NTA Welchrom 6B、Ni NTA Welchrom 6FF 配基為氮川三乙酸,較 IDA 結合 Ni 離子牢固一些。Ni Cel Welchrom 6B、Ni Cel Welchrom 6FF 為自主研發的配基,與 Ni 結合能力更強,可以耐受堿、EDTA、DTT、高濃度尿素和鹽酸胍等苛刻惡劣的溶液環境。樣品可以無需處理直接上樣,非常簡單方便。但其載量會較其他類型低。Ni Welchrom HP 屬于顆粒為 30μm 的填料,其分辨率和載量會更高一些,分離純化效果也更好。
本公司也有未鰲合金屬離子的填料,為 Chelating Welchrom 6FF 和 IMAC Welchrom 6FF ,分別相當于未鰲合 Ni 離子的 Ni IDA Welchrom 6FF 和 Ni NTA Welchrom 6FF??蛻艨梢愿鶕枰孕婿椇喜煌慕饘匐x子,如 Ni 、Cu 、Co、Zn 等。
(2)MBP 標簽蛋白純化填料
將麥芽糖結合蛋白與目的蛋白融合表達,通過麥芽糖結合蛋白和填料上麥芽糖配基特異性結合,將蛋白純化出來。本公司主要有Dextrin Welchrom 6FF 等。
(3)生物素標簽蛋白純化填料
根據生物素與鏈霉親和素的特異性結合原理,將鏈霉親和素當做配基結合到填料上,可以純化生物素化的蛋白。本公司主要的填料類型有 Streptavidin Welchrom 6FF 等。
此外,還有蛋白 A 的標簽蛋白,可以用 IgG Welchrom 4FF 進行純化;Flag 標簽蛋白、HA標簽蛋白、Myc 標簽蛋白、StrepII 標簽蛋白等。